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CRISPR那些事儿
一个有温度的学习基因编辑学习中心
为你解读更多前沿基因编辑技术动态！
FAQ
样本反复检测结果不符
PCR法检测支原体较为灵敏，应注意样本间的交叉污染，取样时，在无菌条件下单独取样每个样品，进行样本处理、PCR反应后，待样本冷却再进行下一步操作，避免气溶胶污染样。
阴性对照出现条带
更换新启用的阴性标品进行复核，注意点样时更换枪头、点样优先阴性及阴性标品存放，避免样品间的交叉污染
如何证明无需筛选仍能取得高编辑效率？
本产品已在多个细胞上验证，RNP系统在转染后4小时内即进入细胞发挥作用，Cas9蛋白在24-48小时降解，顺利获得瞬时高效表达实现编辑，无需持续筛选。
为何对细胞的损伤比较小？
本产品采用先进的生物分子转染技术，相比传统化学转染法的毒性及电转法的物理冲击，具有显著优势。
能否在悬浮细胞中达到相同效率？
通常而言，悬浮细胞转染难度相对较大。然而，本产品凭借卓越性能，不仅适用于贴壁细胞，在悬浮细胞中同样表现出色。以 Jurkat 细胞为例，转染 48h 后即可实现高达 97% 的编辑效率，充分彰显了本产品在悬浮细胞转染方面的高效率优势，可充分满足您对悬浮细胞转染的高标准需求。
若使用试剂盒敲除失败，该如何处理？
使用本试剂盒进行基因敲除时，若出现敲除失败的情况，球盟会生物基因将不收取试剂盒费用，同时，您所支付的试剂盒费用可直接转为球盟会生物基因提供的基因敲除服务费用，确保您在基因编辑实验中无后顾之忧。
是否可以与常规的抗生素和青霉素、链霉素、两性霉素、庆大霉素等混合使用
由于该试剂本身已具备常规抗生素的功能，且为了减少细胞生存压力，我们不建议在使用该试剂期间再使用其他的抗生素。
检测清除细胞仍存在支原体感染
顺利获得处理的细胞，绝大多数支原体应被清除殆尽，如遇减少但未被清除完全，可将工作浓度增加50 %再处理1个周期。
支原体清除导致细胞死亡或状态差
对于大部分细胞，经测试支原体清除无细胞状态上的影响，但对于存在的敏感细胞，建议清除支原体前备份细胞，在清除支原体时细胞死亡或状态差时，将工作浓度减半，周期增加一轮，即28 days。
KO细胞系与基因敲除动物模型有什么区别？
KO细胞系和基因敲除动物模型都用于研究基因功能，但它们各自有不同的应用场景和优势。KO细胞系在体外实验中使用，适用于高通量筛选和细胞水平的基因功能研究。基因敲除动物模型则在体内实验中使用，适用于研究基因在整个生物体中的功能及其与其他基因和环境的相互作用。
什么是KO细胞系？
KO细胞系（Knockout Cell Line）是顺利获得基因编辑技术（如CRISPR-Cas9）敲除或删除特定基因的细胞系。这意味着目标基因被完全移除或失去功能，使研究人员能够观察该基因缺失对细胞行为和生物学过程的影响。这种细胞系在生物医学研究中非常重要，因为它们提供了直接分析基因功能和疾病机制的实验工具。
KO细胞系是否适合所有类型的基因？
虽然KO细胞系技术强大，但并非所有基因都适合敲除。某些基因的敲除可能导致细胞死亡或严重的生理功能障碍，特别是那些对细胞存活至关重要的基因。在这种情况下，可以选择条件性敲除或基因敲降（如RNAi）来研究这些基因的功能。
球盟会生物基因的Bingo™ Prime Editing 7(PE7)平台如何保证点突变的成功率？
球盟会生物基因的Bingo™ Prime Editing 7(PE7)平台基于超过十年的基因编辑经验，结合成千上万个基因编辑CRO项目的总结、优化和提升，具有远超传统基因位点特异性突变系统的成功率。Bingo™ Prime平台采用高效的逆转录酶和精准的先导RNA设计，确保每一次点突变都能达到预期效果。
为什么选择球盟会生物基因点突变服务？
球盟会生物基因全新升级第七代Bingo™ Prime Editing (PE7），优化编辑蛋白和RNA编辑活性。对比第五代PE技术，点突变成功率和基因编辑效率显著提升，全球知名院校博士专家团队一对一服务。
Prime Editing 7（PE7）与传统的CRISPR/Cas9技术有何不同？
传统的CRISPR/Cas9技术主要顺利获得在目标DNA上引入双链断裂，再利用细胞同源重组修复机制来实现基因编辑。这种策略有较多风险，如编辑效率和纯合概率低，容易导致随机的插入或缺失突变等。Prime Editing则不需要DNA双链断裂。Prime Editing具有Cas9n-RT编辑酶系统与pegRNA两个关键组分，可实现更为精确和安全的基因编辑，减少了脱靶效应。
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